Кох хавтанг холбох арга. Аэробик бактерийн цэвэр өсгөвөрийг тусгаарлах арга. Бичил биетнийг механик аргаар салгах зарчимд суурилсан аргууд

Кох аргыг нийт нянгийн тоог тодорхойлоход ашигладаг. Тохирох шингэрүүлэлтээс 1 мл туршилтын материалыг хоосон ариутгасан Петрийн аяганд хийж, 10-15 мл хайлуулж, 45 0 С хүртэл хөргөсөн MPA асгаж, шингэнтэй хольж, аяга тавагыг ширээний гадаргуу дээр эргүүлнэ.

Тариалан тариалсны дараа агарын гадаргуу болон гүнд ургасан колониудыг тоолно. Үүнийг хийхийн тулд аягыг хар дэвсгэр дээр доош нь доош нь байрлуулж, тоологдсон колони бүрийг шилэн дээр тэмдэглэгээ хийдэг. Зөвхөн 30-300 колони ургасан ялтсуудыг л үнэлэв. Хэрэв тавган дээр 300 гаруй колони ургасан бөгөөд дахин шинжилгээ хийх боломжгүй бол томруулдаг шил, тор бүхий тусгай хавтанг ашиглан хажуугийн хүчтэй гэрэлтүүлгийн дор колониудыг тоолж болно.

Колонийн тоог хавтангийн өөр өөр газарт 1 см 2 талбайтай дор хаяж 20 квадратаар тоолно. 1 см2 талбайд колонийн дундаж тоог тооцоолж, тавагны талбайгаар үржүүлнэ.

Колони тоолохдоо бактери тоолох тусгай төхөөрөмж болох PSB ашиглаж болно.

Хоол бүр дэх колони тоолох үр дүн нь шингэрүүлэлтийг харгалзан 1 мл (см 3) эсвэл 1 г шинжилгээний материалын нянгийн тоо юм. Бактерийн эцсийн тоог хоёр зэргэлдээ шингэрүүлэгчээр тарьсан хавтан дээрх колони тоолох үр дүнгийн арифметик дундажаар авна.

Жишээ:шингэрүүлэлт 10 -1 - 250 колони, шингэрүүлэлт 10 -2 - 23 колони.

Нийт бактерийн тоо = 250 x 10 + 23 x 100 / 2 = 2400 cfu / мл = 2.4 x 10 2 cfu / мл (мл тутамд колони үүсгэх нэгж).

Судалгааны үр дүнг 2-3 чухал тоо болгон дугуйлж болно.

Титрлэх арга.

SPM-ийн тоог тодорхойлоход ашигладаг.

1-р шат:материалыг нэгэн төрлийн болгох. Шаардлагатай бол бичил биетнийг шингэн үе рүү шилжүүлэх суспензийг бэлтгэнэ.

2-р шат:цуврал шингэрүүлэлт бэлтгэх.

3-р шат:Шинжилгээний материалын сонгосон хэмжээ (100, 10, 1 мл) ба түүний 1 мл шингэрүүлэлтийг шингэн тэжээлт орчинд тарих. Аргын нарийвчлалыг нэмэгдүүлэхийн тулд эзлэхүүн бүрийг шим тэжээлийн бодисын хэд хэдэн хэсэгт (хоёр, гурав, таван эгнээний тариалалт) зэрэгцүүлэн тарьж болно. Хамгийн оновчтой нь гурван дахин давталт (харьцангуй бага зардлаар хангалттай найдвартай).

4-р шат:шингэн тэжээллэг орчинд ургах, эерэг эзэлхүүнээс хатуу тэжээллэг орчинд тариалах зэргийг харгалзан үзнэ.

5-р шат:хатуу тэжээллэг орчинд ургасан бичил биетнийг тодорхойлох. Энэ тохиолдолд соёлын шинж чанарыг харгалзан үзэж, шаардлагатай бол нэмэлт судалгаа (tinctorial, морфологи, биохими, ийлдэс судлалын шинж чанарыг судлах) хийдэг.

Хэрэв нэг эгнээний аргыг хэрэглэвэл үр дүн нь хүссэн бичил биетний титр хэлбэрээр илэрхийлэгддэг бөгөөд энэ нь одоог хүртэл олдсон хамгийн бага хэмжээ (хамгийн их шингэрүүлэлт) гэж тооцогддог.

Хэрэв олон эгнээний аргыг ашигласан бол өсөлтийг өгсөн эерэг эзлэхүүний хослолд үндэслэн титр эсвэл индексийг (TNI) тодорхойлох боломжийг олгодог тусгай хүснэгт ашиглан үр дүнг бүртгэнэ.

Бактерийг цэвэр өсгөвөр болгон тусгаарлах харьцангуй цөөн арга байдаг. Энэ нь ихэвчлэн хатуу өсгөвөрлөгч дээр бие даасан эсүүдийг тусгаарлах, судал бүрэх аргыг ашиглах, эсвэл бага хэмжээний шингэн өсгөврийг ялтсууд руу цутгах замаар хийгддэг ( хязгаарлах шингэлэх арга). Гэсэн хэдий ч тусдаа колони олж авах нь соёлын цэвэр байдлыг үргэлж баталгаажуулдаггүй, учир нь колони нь зөвхөн бие даасан эсээс төдийгүй тэдгээрийн кластераас ургаж болно. Хэрэв бичил биетүүд салиа үүсгэдэг бол гадны хэлбэрүүд ихэвчлэн хавсардаг. Цэвэршүүлэхийн тулд сонгомол бус орчин (NSM) ашиглах нь зүйтэй, учир нь бохирдуулагч бичил биетүүд түүн дээр илүү сайн үржиж, илрүүлэхэд хялбар байдаг.

Хатуу тэжээллэг орчинд тусгаарлагдсан колони авах нь бичил биетний суспензийг хусуураар шигших замаар хийгддэг ( Кох арга), эсвэл бактериологийн гогцоо ашиглан ( ядрах цус харвалтын арга). Бичил биетний эсийг механик аргаар салгасны үр дүнд тус бүр нь нэг төрлийн микробын тусгаарлагдсан колони үүсгэдэг.

Хусгуураар шигших (Кох арга)дараах дарааллаар үйлдвэрлэсэн:

1) баяжуулах өсгөвөрийн дуслыг 1-р таваг дахь шим тэжээлийн орчны гадаргуу дээр ариутгасан пипеткээр хэрэглэж, ариутгасан хусуураар тараана;

2) хусуурыг гаргаж, аягыг хурдан хааж, хусуурыг ариутгалгүйгээр 2-р аяга руу шилжүүлнэ. Урьд нь дээжийг тараахад хэрэглэж байсан хусуурын нэг тал нь түүний гадаргуу дээр хүрч, орчны бүх гадаргуу дээрх өсгөвөрийн тархалтыг дуурайлган хийх;

3) №3 аяганд яг ижил үйлдлийг хийж, дараа нь хусуурыг ариутгана;

4) үрийн таваг нь термостатад байрлуулж, хамгийн оновчтой температурт өсгөвөрлөнө.

Тодорхой хугацааны дараа аягануудыг термостатаас салгаж, бичил биетний өсөлтийг судалдаг. Ихэвчлэн 1-р аяганд нянгийн тасралтгүй өсөлт ажиглагдаж, дараагийн аяганд колони ажиглагддаг.

Гогцоо шигших (сууг зайлуулах арга)Петрийн аяган дахь агар орчны гадаргуу дээр баяжуулах өсгөвөрөөс нян судлалын гогцоо тарихад хамаарна. Эхний шатанд өсгөвөртэй гогцоо ашиглан агарын орчинд хэд хэдэн зэрэгцээ цус харвалт хийнэ (Зураг 4.2, А). Гогцоог ариутгаж, агарын тариагүй хэсэгт хөргөж, эхнийх рүү перпендикуляр чиглэлд хэд хэдэн цохилт хийнэ (Зураг 4.2, Б). Дараа нь гогцоо дахин ариутгаж, хөргөж, цус харвах чиглэлд хэрэглэнэ IN(Зураг 4.2), дараагийн ариутгалын дараа - чиглэлд Г(Зураг 4.2). Аяга нь термостатад тавигдаж, тодорхой хугацааны дараа үр дүнг харгалзан үздэг. Ихэвчлэн цус харвалт дээр байдаг АТэгээд Бцус харвах үед олон тооны колони ургадаг (заримдаа тасралтгүй өсөлт). INТэгээд Гтусгаарлагдсан колони үүсдэг.


Зураг 4.2 – Тусгаарлагдсан колони авахын тулд бактерийг судалтай шигших схем

Хатуу орчинд цуваа шингэрүүлэлт- ялтсуудыг тарих хамгийн энгийн арга бөгөөд дээжийг ариутгасан хайлуулж, хөргөсөн агар бүхий туршилтын хоолойд тарьсны дараа орчинг хольж, Петрийн аяганд хийж, хатууруулахыг зөвшөөрдөг. Сайн тусгаарлагдсан колони авахын тулд дараалсан арав дахин шингэрүүлэлт бэлдэж, 1 мл дээжийг аяганд шууд хийж, 15-20 мл хайлсан агар тэжээл нэмж, аяга сэгсэрч холино. Заримдаа бие даасан колони нь агард дүрж дуусдаг бөгөөд зөвхөн механик аргаар устгаж болно. Бактери нь хайлсан агарын температуртай орчинд хэсэг хугацаанд байх нь муу юм.

Микробиологи, вирус судлал, дархлаа судлалын хөгжлийн үндсэн үе шатууд

Үүнд дараахь зүйлс орно.

1.Эмпирик мэдлэг(микроскопыг зохион бүтээхээс өмнө ба тэдгээрийг бичил ертөнцийг судлахад ашиглах).

J. Fracastoro (1546) халдварт өвчний үүсгэгч бодисуудын амьд шинж чанарыг санал болгосон - contagium vivum.

2.Морфологийн үехоёр зуу орчим жил болсон.

Антони ван Левенгук 1675 онд анх 1683 онд эгэл биетийг тодорхойлсон - бактерийн үндсэн хэлбэр. Багаж хэрэгслийн төгс бус байдал (X300 микроскопыг хамгийн их өсгөх) болон бичил ертөнцийг судлах аргууд нь бичил биетний талаархи шинжлэх ухааны мэдлэгийг хурдан хуримтлуулахад хувь нэмэр оруулаагүй.

3.Физиологийн үе(1875 оноос хойш) - Л.Пастер, Р.Кох нарын эрин үе.

Л.Пастер - исгэх, ялзрах үйл явцын микробиологийн үндсийг судлах, үйлдвэрлэлийн микробиологийг хөгжүүлэх, байгаль дахь бодисын эргэлтэд бичил биетний гүйцэтгэх үүргийг тодруулах, нээлт агааргүйбичил биетэн, зарчмуудыг хөгжүүлэх асепси,аргууд ариутгал,сулрах ( сулрах)хоруу чанарболон хүлээн авах вакцин (вакцины омог).

R. Koch - тусгаарлах арга цэвэр соёлхатуу тэжээллэг орчин, бактерийг анилин будгаар будах арга, боом, холер өвчний үүсгэгч бодисыг илрүүлэх ( Кох таслал), сүрьеэ (Кох саваа),микроскопийн техникийг сайжруулах. Henle-Koch postulates (гурвал) гэгддэг Хенле шалгуурын туршилтын үндэслэл.

4.Дархлаа судлалын үе.

И.И.Мечников бол Эмил Ругийн дүрслэлийн тодорхойлолтоор "микробиологийн яруу найрагч" юм. Тэрээр микробиологийн шинэ эрин үеийг бий болгосон - дархлаа (дархлаа) тухай сургаал, фагоцитозын онолыг боловсруулж, эсийн дархлааны онолыг үндэслэсэн.

Үүний зэрэгцээ бие махбод дахь үйлдвэрлэлийн талаархи мэдээлэл хуримтлагдсан эсрэгбиебактери ба тэдгээрийн эсрэг хорт бодис,Энэ нь П.Эрлихэд дархлааны хошин онолыг хөгжүүлэх боломжийг олгосон. Фагоцит ба хошин онолыг дэмжигчдийн хоорондох удаан хугацааны үр дүнтэй хэлэлцүүлгийн үр дүнд дархлааны олон механизмууд илэрч, шинжлэх ухаан бий болжээ. дархлаа судлал.

Дараа нь удамшлын болон олдмол дархлаа нь дархлааны хариу урвалын янз бүрийн хэлбэрийг хангадаг макрофаг, комплемент, Т ба В-лимфоцит, интерферон, гистокомпатын үндсэн систем болох таван үндсэн системийн уялдаа холбоотой үйл ажиллагаанаас хамаардаг болохыг хожим олж тогтоосон. 1908 онд И.И.Мечников, П.Эрлих нар. Нобелийн шагнал гардуулав.

1892 оны хоёрдугаар сарын 12 ОХУ-ын ШУА-ийн хурал дээр Д.И.Ивановский тамхины мозайк өвчний үүсгэгч бодисыг шүүдэг вирус гэж мэдэгдэв. Энэ өдрийг төрсөн өдөр гэж үзэж болно вирус судлал, мөн Д.И.Ивановский түүний үүсгэн байгуулагч юм. Дараа нь вирус нь зөвхөн ургамалд төдийгүй хүн, амьтан, тэр ч байтугай нянгийн өвчин үүсгэдэг болох нь тогтоогджээ. Гэвч ген, удамшлын кодын мөн чанар тогтоосны дараа л вирусыг амьд байгаль гэж ангилсан.

5. Микробиологийн хөгжлийн дараагийн чухал үе шат байв антибиотикийн нээлт. 1929 онд А.Флеминг пенициллинийг нээсэн ба антибиотик эмчилгээний эрин үе эхэлсэн нь анагаах ухаанд хувьсгалт дэвшил авчирсан. Хожим нь микробууд антибиотикт дасан зохицдог болох нь тогтоогдсон бөгөөд эмэнд тэсвэртэй байдлын механизмыг судлах нь хоёрдахь зүйлийг нээхэд хүргэсэн. хромосомын гадуурх (плазмид) геномбактери.

Сурч байна плазмидуудТэд вирусээс ч илүү энгийн бүтэцтэй организмууд, мөн адилгүй болохыг харуулсан бактериофагуудбактерид хор хөнөөл учруулахгүй, харин тэдэнд нэмэлт биологийн шинж чанарыг өгдөг. Плазмидуудын нээлт нь амьдралын оршин тогтнох хэлбэр, түүний хувьслын боломжит замуудын талаархи ойлголтыг ихээхэн өргөжүүлсэн.

6. Орчин үеийн молекул генетикийн үе шат 20-р зууны хоёрдугаар хагаст генетик, молекул биологийн ололт амжилт, электрон микроскоп бий болсонтой холбоотойгоор микробиологи, вирус судлал, дархлаа судлалын хөгжил эхэлсэн.

Бактери дээр хийсэн туршилтууд нь удамшлын шинж чанарыг дамжуулахад ДНХ-ийн үүрэг гүйцэтгэдэг болохыг нотолсон. Бактери, вирус, хожуу плазмидыг молекул биологи, генетикийн судалгааны объект болгон ашиглах нь амьдралын үндсэн үйл явцыг илүү гүнзгий ойлгоход хүргэсэн. Бактерийн ДНХ-д генетикийн мэдээллийг кодлох зарчмуудыг тодруулж, удамшлын кодын түгээмэл байдлыг бий болгосноор илүү өндөр зохион байгуулалттай организмд хамаарах молекулын генетикийн хэв маягийг илүү сайн ойлгох боломжтой болсон.

Escherichia coli-ийн геномыг тайлсан нь генийг зохион бүтээх, шилжүүлэн суулгах боломжтой болсон. Одоогоор Генетикийн инженерчлэлшинэ чиглэлийг бий болгосон биотехнологи.

Олон тооны вирүсийн молекул генетикийн зохион байгуулалт, тэдгээрийн эсүүдтэй харилцах механизмыг тайлж, вирусын ДНХ-ийн мэдрэмтгий эсийн геномд нэгдэх чадвар, вирусын хорт хавдар үүсгэх үндсэн механизмыг тогтоосон.

Дархлаа судлал нь жинхэнэ хувьсгалыг хийж, халдварт дархлаа судлалын хүрээнээс хол давж, анагаах ухаан, биологийн хамгийн чухал суурь салбаруудын нэг болжээ. Өнөөдрийг хүртэл дархлаа судлал нь зөвхөн халдварын эсрэг хамгаалалтыг судалдаг шинжлэх ухаан юм. Орчин үеийн утгаараа Дархлаа судлал нь бие махбодийн бүтэц, үйл ажиллагааны бүрэн бүтэн байдлыг хадгалж, генетикийн хувьд гадны бүх зүйлээс бие махбодийг хамгаалах механизмыг судалдаг шинжлэх ухаан юм.

Дархлаа судлалд одоогоор хэд хэдэн төрөлжсөн чиглэлүүд багтдаг бөгөөд үүнд халдварт дархлаа судлалаас гадна хамгийн чухал нь иммуногенетик, иммуноморфологи, шилжүүлэн суулгах дархлаа судлал, иммунопатологи, иммуногематологи, онкоиммунологи, онтогенезийн иммунологи, вакцинологи, хэрэглээний дархлааны оношлогоо зэрэг орно.

Микробиологи, вирус судлал зэрэг биологийн суурь шинжлэх ухаанҮүнд ерөнхий, техникийн (үйлдвэрлэлийн), хөдөө аж ахуй, мал эмнэлгийн болон хүн төрөлхтөнд хамгийн чухал ач холбогдолтой хэд хэдэн бие даасан шинжлэх ухааны салбаруудыг багтаасан болно. эмнэлгийн микробиологи, вирус судлал.

Эмнэлгийн микробиологи, вирус судлал нь хүний ​​халдварт өвчний үүсгэгч бодисыг (тэдгээрийн морфологи, физиологи, экологи, биологи, генетикийн шинж чанарыг) судалж, тэдгээрийг тариалах, тодорхойлох арга, оношлох, эмчлэх, урьдчилан сэргийлэх тусгай аргыг боловсруулдаг.

Бичил биетний цэвэр өсгөвөрариутгасан тэжээллэг орчинд ургасан ижил төрлийн эсийн популяци юм. Нэг эх эсийн үр удмыг олж авснаар цэвэр өсгөвөр тусгаарлагдана. Өсгөвөр нь хатуу тэжээллэг орчинд бие даасан колони хэлбэрээр ургаж болно.

Аэробик бичил биетний цэвэр өсгөврийг тусгаарлах арга.

Микробын хольцоос цэвэр өсгөврийг тусгаарлах бүх аргыг 2 бүлэгт хувааж болно.

    Бичил биетнийг механик аргаар тусгаарлах зарчимд суурилсан арга;

    Бичил биетний биологийн шинж чанарт суурилсан аргууд.

Бичил биетнийг механик аргаар салгах зарчимд суурилсан аргууд

Дригалскийн дагуу хусуураар шигших

Шим тэжээлтэй 3 Петрийн савыг авна. Туршилтын материалын дуслыг гогцоо эсвэл пипеткээр эхний аяганд түрхэж, агарын бүх гадаргуу дээр хусуураар үрнэ. Дараа нь хусуурыг хоёр дахь аяга руу шилжүүлж, хусуур дээр үлдсэн өсгөвөрийг шим тэжээлийн бодисын гадаргуу руу үрнэ. Дараа нь хусуурыг гурав дахь Петрийн аяга руу шилжүүлж, тарих ажлыг ижил аргаар хийнэ. Эхний хавтан дээр колонийн хамгийн их тоо ургадаг (хатуу өсөлт), гурав дахь нь - тусдаа байрладаг колони хэлбэрээр хамгийн бага тоо.

Ядаргааны цус харвалтын арга

Хэвлэл мэдээллийн хэрэгсэл, багаж хэрэгслийг хэмнэхийн тулд та нэг аяга хэрэглэж, 4 хэсэгт хувааж, судалтай дараалан тарьж болно. Үүнийг хийхийн тулд материалыг гогцооноор авч, бие биенээсээ 5 мм-ийн зайд хэд хэдэн зэрэгцээ зураасыг зурж, эхлээд эхний хэсгийн гадаргуугийн дагуу, дараа нь гогцоонд үлдсэн эсүүдтэй хамт бусад бүх секторуудыг дараалан тарина. . Дараагийн цус харвалт бүрт үрийн эсийн тоо буурдаг. Шигшсэний дараа савыг доош нь эргүүлж, Петрийн аяганы таган дээр үүссэн конденсацын ус нь тусгаарлагдсан колони авахад саад болохгүй. Янз бүрийн бичил биетний өсөлтийн хурд ижил биш тул аяга нь термостатад 1-7 хоног хадгалагдана.

Тиймээс эхний салбаруудад тасралтгүй өсөлтийг олж авдаг бөгөөд дараагийн цус харвалтын дагуу тусгаарлагдсан колониуд ургадаг бөгөөд энэ нь нэг эсийн үр удмыг төлөөлдөг.

Халаах арга

Спор үүсгэгч нянг спорын бус хэлбэрээс салгах боломжийг танд олгоно. Туршилтын материалыг усан ваннд 80 градусын температурт 10-15 минутын турш халаана. Энэ тохиолдолд ургамлын хэлбэрүүд үхэж, спорууд нь хадгалагдаж, зохих тэжээллэг орчинд тариалах үед соёолж, зөвхөн спор үүсгэгч бактерийн колони үүсгэдэг.

Баяжуулах арга

Судалгаанд хамрагдаж буй материалыг тодорхой төрлийн бичил биетний өсөлтийг дэмждэг сонгомол тэжээллэг орчинд тарьдаг.

Лабораторийн амьтдыг халдварлах арга

Энэ аргыг гадны микрофлороор бохирдсон эмгэгийн материалаас цэвэр өсгөврийг тусгаарлах, эсвэл судалж буй материалд эмгэг төрүүлэгч бичил биетүүд маш цөөхөн байгаа тохиолдолд хэрэглэнэ.

Халдварын хувьд сэжигтэй эмгэг төрүүлэгчид хамгийн мэдрэмтгий амьтны төрлийг сонгоно. Жишээлбэл, цэрнээс пневмококкийг тусгаарлахын тулд цагаан хулгана халдвар авсан байдаг. Энэ амьтан нь энэ бичил биетэнд маш мэдрэмтгий бөгөөд цэрний бусад бичил биетүүдэд тэсвэртэй байдаг. Үүнтэй холбоотойгоор пневмококк нь хулганы биед хурдан үржиж, бусад микробууд үхдэг. Халдвар авснаас хойш 18-20 цагийн дараа хулганыг тахил болгож, зүрхнээс авсан цусыг шим тэжээлт орчинд тарина. Цус нь нэг пневмококк агуулдаг тул шим тэжээлт орчинд цэвэр өсгөвөр ургадаг.

Бичил биетний биологийн шинж чанарт суурилсан аргууд

Цэвэр өсгөвөрийг тусгаарлах биологийн аргууд нь тусгаарлагдсан микробын нэг буюу өөр шинж чанарыг харгалзан үзэхэд суурилдаг бөгөөд энэ нь түүнийг түүнтэй холилдсон бусад хүмүүсээс ялгаж өгдөг.

Шукевичийн арга

Хөдөлгөөнт бичил биетнийг тусгаарлахад ашигладаг. Туршилтын материалыг туршилтын хоолойд байрлуулсан налуу агарын конденсацийн усанд тарина. Нөхөн үржихүйн явцад конденсацийн уснаас микробын хөдөлгөөнт хэлбэрүүд агарын гадаргуу дээр "мөлхөж" байгаа мэт тархдаг. Өсөлтийн дээд хэсгээс шинэ тэжээллэг бодисыг конденсацийн усанд тарьдаг. Энэ аргаар хэд хэдэн дэд соёлыг хийснээр эцэст нь хөдөлгөөнт бактерийн цэвэр өсгөвөрийг олж авдаг.

Дарангуйлах арга

Тодорхой химийн бодис, антибиотикийн бичил биетэнд үзүүлэх өөр өөр нөлөөнд үндэслэсэн. Зарим бодисууд нь зарим бичил биетний өсөлтийг саатуулж, бусдад ямар ч нөлөө үзүүлэхгүй. Жишээлбэл, пенициллиний бага концентраци нь грам эерэг бичил биетний өсөлтийг саатуулж, грам сөрөг бичил биетэнд нөлөөлдөггүй.

Цэвэр соёлыг тусгаарлах эхний үе шат

    Шалгаж буй материалаас түрхэц бэлтгэж, Грамаар будаж, микроскопоор шалгана.

    Петрийн аяганд шимт агараар тарина. Үүнийг хийхийн тулд туршилтын материалыг шаардлагатай бол ариутгасан давсны уусмалаар шингэлнэ. Бэлтгэсэн шингэрүүлгийн нэг дуслыг Петрийн аяганд байгаа шим тэжээлийн бодисын гадаргуу дээр гогцоо хэлбэрээр түрхэж, хусуураар сайтар үрж, материалыг бүхэлд нь жигд тараана. Тариалсны дараа аягыг доош нь эргүүлж, шошгон дээр байрлуулж, 37ºC температурт 18-24 цагийн турш термостатад хийнэ.

    Тариалалт нь сонгомол тэжээллэг орчинд явагддаг.

    Өсгөвөрлөлтийг дифференциал оношилгооны хэрэгслээр явуулдаг.

    Лабораторийн амьтад шинжилгээний материалаар халдварладаг.

Германы эмч, эрдэмтэн Роберт Кох (1843-1910) сүрьеэгийн эсрэг хийсэн микробиологийн ажилд Нобелийн шагнал хүртжээ. Тэрээр мөн микробиологийн судалгааны олон үндсэн аргуудыг бүтээсэн бөгөөд зарим нь өнөөг хүртэл ашиглагдаж байна.

Насан туршийн ажил

19-р зууны төгсгөлд сүрьеэгийн улмаас Европ дахь бүх дунд насны хүмүүсийн бараг гуравны нэг нь нас баржээ. Тухайн үеийн эмч, эрдэмтэд эмчилгээний аргыг олох гэж олон оролдлого хийсэн. Кох Роберт үл хамаарах зүйл биш байсан бөгөөд энэ ноцтой өвчинтэй тэмцэх нь түүний эрхэм зорилго, бүх амьдралынх нь ажил болжээ. Энэ өвчнийг илрүүлэх, эмчлэхэд асар их ахиц дэвшил гаргаж, тэр ч байтугай энэ бүтээлээрээ Анагаах ухааны салбарт Нобелийн шагнал хүртсэн ч эрдэмтэн бүхэл бүтэн микробиологид томоохон нөлөө үзүүлсэн судалгааны аргуудыг сайжруулахаа зогсоосонгүй.

Залуу нас ба мэргэжил сонголт

Ирээдүйн эрдэмтний эцэг эх нь ядуу уурхайчид байсан бөгөөд чадварлаг хүүгийн хувь заяа тэдэнд юу өгсөнийг гайхаж байв. 1843 онд Клаустальд (Герман) төрсөн Генрих Херманн Роберт Кох хүүхэд байхдаа жинхэнэ гайхалтай хүүхэд байжээ. Таван настайдаа тэрээр аль хэдийн сонин уншиж байсан бөгөөд хэсэг хугацааны дараа тэрээр сонгодог уран зохиолыг сонирхож, шатрын спортын мэргэжилтэн болжээ. Шинжлэх ухааны сонирхол маань ахлах ангиасаа эхэлж биологийг дуртай хичээлээрээ сонгосон.

1866 онд 23 настайдаа Генрих Роберт Кох анагаах ухааны докторын зэрэг хамгаалж, дараагийн арван жилийг янз бүрийн эмнэлэг, засгийн газрын шинжлэх ухааны нийгэмлэгүүдэд эмчээр ажилласан. 1876 ​​онд тэрээр боом өвчний талаархи томоохон судалгаагаа нийтэлсэн нь түүнд өргөн алдар нэрийг авчирсан. Хэдэн жилийн дараа тэрээр эрүүл мэндийн товчооны зөвлөхөөр томилогдсон бөгөөд ихэнх цагаа сүрьеэтэй холбоотой асуудлуудыг шийдвэрлэхэд зарцуулдаг байв.

Сүрьеэгийн шалтгааныг тодорхойлох

Орчин үеийн анагаах ухаан ихэнх өвчний олон шалтгааныг мэддэг. Кох Робертийн амьдарч байсан цаг үед энэ мэдлэг тийм ч түгээмэл байгаагүй. Эрдэмтний анхны чухал нээлтүүдийн нэг нь энэхүү үхлийн аюултай өвчнийг үүсгэдэг сүрьеэгийн микобактерийг илрүүлсэн явдал юм. Роберт Кох халдварын шалтгааныг судалж байхдаа сармагчин, үхэр, хүн гэсэн гурван халдвартай амьтны аль нэгнийх нь материалаар далайн гахайг зориудаар халдварлажээ. Үүний үр дүнд халдвар авсан гахайн нян нь халдварын голомтоос үл хамааран халдвар авсан гахайн нянтай ижил байсан нь тогтоогджээ.

Кохын постулатууд

Роберт Кох микробиологид ямар хувь нэмэр оруулсан бэ? Хамгийн их нөлөөлсөн аргуудын нэг нь дөрвөн нөхцөл хангагдсан тохиолдолд өвчний үүсгэгчийг өндөр итгэлтэйгээр тодорхойлж болно гэсэн санал байсан бөгөөд хожим нь Кохын постулат гэж нэрлэгдэх болсон. Тэд энд байна:

  1. Бичил биет нь элбэг байдаг бүх организмд өвчин үүсгэх ёстой тул халдваргүй организмд байх ёсгүй.
  2. Сэжигтэй микробыг тусгаарлаж, цэвэр хэлбэрээр нь өсгөх ёстой.
  3. Микробыг дахин нутагшуулах нь өмнө нь халдвар аваагүй организмд өвчин үүсгэх ёстой.
  4. Сэжигтэй бичил биетийг туршилтын организмаас дахин тусгаарлаж, цэвэр хэлбэрээр ургуулсан, анх тусгаарлагдсан микробтой ижил байх ёстой.

Бактериологи, микробиологийг үндэслэгч

Германы эмч Роберт Кохын судалсан өвчний дунд (1876 онд боом, 1882 онд сүрьеэ) 1883 онд холер ч байсан. 1905 онд эрдэмтэн физиологи, анагаах ухааны салбарт Нобелийн шагнал хүртжээ. Генрих Херманн Роберт Кох анагаахын оюутан байхдаа эмгэг судлал, халдварт өвчнийг маш их сонирхдог байв. Тэрээр эмчийн хувьд Герман даяар олон жижиг хотод ажиллаж байсан бөгөөд Франц-Пруссын дайны үеэр (1870-1872) цэргийн мэс заслын эмчээр сайн дураараа фронтод явсан.

Дараа нь түүнийг орон нутгийн эмнэлгийн ажилтнаар томилсон бөгөөд түүний гол үүрэг нь халдварт бактерийн халдварын тархалтыг судлах явдал байв. Анагаах ухаанд биотехнологийн хэрэглээ нь халдварт өвчний шалтгааныг баримтжуулахын тулд Кохын зарчимд ихээхэн тулгуурладаг. Агуу эрдэмтэн 1910 онд Хар ойн бүсэд (Герман) нас барсан бөгөөд тэрээр 66 настай байжээ.

Боом өвчний судалгаа

Роберт Кохын амьдарч байсан тэр үед Вёллштейн нутгийн фермийн амьтдын дунд боом өвчин тархсан байв. Эрдэмтэд тухайн үед шинжлэх ухааны ямар ч тоног төхөөрөмж байгаагүй, номын сан, бусад эрдэмтэдтэй холбоо тогтоох боломжгүй байв. Гэсэн хэдий ч энэ нь түүнийг зогсоосонгүй, тэр энэ өвчнийг судалж эхлэв. Түүний лаборатори нь гэр нь байсан 4 өрөө байр, гол тоног төхөөрөмж нь эхнэрийнхээ бэлэглэсэн микроскоп байв.

Поллендер, Рэйер, Давайн нянгууд нь боом өвчний үүсгэгч болохыг өмнө нь илрүүлж байсан бөгөөд Кох энэ нян нь уг өвчний үүсгэгч гэдгийг шинжлэх ухааны үндэслэлтэйгээр нотлохоор зорьжээ. Тэрээр уг өвчнөөр үхсэн фермийн амьтдын дэлүүнээс авсан боомын нянгаар гар хийцийн модны үртэс ашиглан хулгануудад тарьсан байна. Мэрэгчдийн үхэл яг малын цусанд халдвар орсны үр дүнд үүссэн болохыг тогтоожээ. Энэ баримт нь боомоор өвчилсөн малын цусаар дамжин халдварладаг гэсэн бусад эрдэмтдийн дүгнэлтийг баталжээ.

Боомын нян нь гадаад орчинд тэсвэртэй байдаг

Гэвч энэ нь Кохын сэтгэлд хүрсэнгүй. Тэрээр мөн эдгээр бичил биетүүд ямар ч төрлийн амьтны биетэй хэзээ ч холбоогүй байсан бол өвчин үүсгэж болох эсэхийг мэдэхийг хүссэн. Энэ асуудлыг шийдэхийн тулд тэрээр нянгийн цэвэр өсгөвөр олж авсан. Роберт Кох тэдгээрийг судалж, гэрэл зургийг нь авч үзэхэд тэд тааламжгүй нөхцөлд хүчилтөрөгчийн дутагдал болон бусад бактерийн сөрөг хүчин зүйлийг тэсвэрлэх чадвартай спор үүсгэдэг гэсэн дүгнэлтэд хүрчээ. Тиймээс тэд гадаад орчинд нэлээд удаан амьдрах чадвартай бөгөөд тохиромжтой нөхцөл бүрдвэл тэдний эрч хүч сэргэж, споруудаас нян гарч ирдэг бөгөөд тэдгээр нь урьд өмнө нь байсан ч тэдгээр нь нэвтэрч буй амьд организмыг халдварлах чадвартай байдаг. тэдэнтэй холбоо барихгүй.

Роберт Кох: нээлт, ололт амжилт

Боом өвчний эсрэг хийсэн шаргуу ажлынхаа үр дүнг Кох Бреслаугийн их сургуулийн ургамал судлалын профессор Фердинанд Конд үзүүлж, хамт олноо цуглуулж, нээлтийг гэрчлэв. Оролцогчдын дунд анатомийн эмгэг судлалын профессор Конхейм байсан. Хүн бүр Кохын ажилд гүн гүнзгий сэтгэгдэл төрүүлсэн бөгөөд 1876 онд ботаникийн сэтгүүлд энэ сэдвээр нийтлэл хэвлэгдсэний дараа Кох тэр даруй алдартай болжээ. Гэсэн хэдий ч тэрээр Wöllstein-д дахин дөрвөн жил ажилласан бөгөөд энэ хугацаанд бактерийг бүртгэх, будах, гэрэл зураг авах арга барилаа сайжруулсан.

Берлин дэх амьдрал

Хожим нь Берлинд тэрээр нян судлалын аргыг үргэлжлүүлэн сайжруулж, төмс гэх мэт хатуу орчинд цэвэр бактерийг ургуулах шинэ аргыг зохион бүтээжээ. Роберт Кохын үргэлжлүүлэн ажиллаж байсан салбар болох микробиологи нь саяхныг хүртэл түүний нарийн мэргэжил хэвээр байв. Мөн тэрээр бактерийг илүү харагдахуйц болгож, танихад тусалсан нянг будах шинэ аргыг боловсруулсан. Энэ бүх ажлын үр дүн нь эмгэг төрүүлэгч бактерийг бусад организмаас ангид цэвэр өсгөвөрт хялбар, хялбар аргаар гаргаж авч, илрүүлж, таних аргуудыг нэвтрүүлсэн явдал юм. Берлинд ирснээсээ хойш хоёр жилийн дараа Кох сүрьеэгийн нян, түүнчлэн түүнийг цэвэр хэлбэрээр нь өсгөх аргыг олж нээсэн.

Холерын эсрэг тэмцэнэ

Кох 1883 онд Египетэд холер өвчний дэгдэлтийг судлахаар Германы комиссын ахлагчаар илгээгдэж байхдаа сүрьеэгийн эсрэг ажилласаар завгүй байв. Энд тэрээр өвчин үүсгэгч Вибриог илрүүлж, цэвэр соёлыг Германд авчирсан. Тэрээр Энэтхэгт мөн ижил төстэй асуудлыг авч үзсэн. Түүний биологи, холерын тархалтын талаархи мэдлэгт үндэслэн эрдэмтэд 1893 онд Дрезден хотод их гүрнүүдээр батлагдсан тахалтай тэмцэх дүрмийг боловсруулж, өнөөг хүртэл хэрэглэж байгаа тэмцэх аргуудын үндэс болсон.

Өндөр албан тушаалд томилогдох

1885 онд намтар нь жижиг хот, ядуу гэр бүлээс гаралтай Роберт Кох Берлиний их сургуулийн эрүүл ахуйн профессороор томилогдсон. 1890 онд тэрээр ерөнхий мэс заслын эмчээр томилогдсон бөгөөд 1891 онд Анагаах ухааны факультетийн хүндэт профессор, халдварт өвчний шинэ хүрээлэнгийн захирал болжээ. Энэ хугацаанд Кох сүрьеэтэй тэмцэх ажилд буцаж ирэв. Тэрээр микобактероор үүсгэгдсэн туберкулин хэмээх эмээр өвчнийг зогсоохыг оролдсон. Мансууруулах бодисын хоёр хувилбар бий болсон. Эхнийх нь тэр даруй томоохон маргаан үүсгэв. Харамсалтай нь энэ эмийн эдгээх хүчийг хэтрүүлсэн бөгөөд түүнд тавьсан найдвар нь үндэслэлгүй байв. Шинэ туберкулиныг (хоёрдахь хувилбар) 1896 онд Кох зарласан бөгөөд түүний эмийн үнэ цэнэ нь бас урам хугарсан боловч энэ нь оношлогооны ач холбогдолтой бодисыг илрүүлэхэд хүргэсэн.

Дараа нь тахал, хумхаа, трипаносомиаз...

1896 онд Кох үхрийн хортон шавьжийн гарал үүслийг судлахаар Өмнөд Африкт очжээ. Хэдийгээр энэ өвчний шалтгааныг олж тогтоох боломжгүй байсан ч дэгдэлтийг зогсоосон хэвээр байна. Үүний дараа Энэтхэг, Африкт хумхаа, Blackwater халуурал, трипаносомиаз, үхрийн хортон шавьжтай тэмцэх ажил эхэлсэн. Эдгээр өвчний талаарх түүний ажиглалтыг нийтэлсэн нь 1898 онд. Германд буцаж ирсний дараахан түүний дэлхий даяар хийсэн аялал үргэлжилсээр байв. Энэ удаад Итали улс байсан бөгөөд тэрээр хумхаа өвчний талаар Сэр Рональд Росс хийсэн ажлыг баталж, хумхаа өвчний янз бүрийн хэлбэрийн этиологи, тэдгээрийг хининээр хянах талаар ашигтай ажил хийсэн.

Микробиологийн салбарт оруулсан хувь нэмэр: хүндэт шагнал, медаль

Амьдралынхаа сүүлийн жилүүдэд Кох хүн, үхэрт сүрьеэ үүсгэдэг нян нь ижил биш гэсэн дүгнэлтэд хүрчээ. 1901 онд Лондонд болсон Сүрьеэгийн эсрэг олон улсын анагаах ухааны конгресс дээр түүний мэдэгдэл маш их маргаан үүсгэсэн боловч Кохын үзэл бодол зөв байсан нь одоо мэдэгдэж байна. Түүний хижиг өвчний талаар хийсэн ажил нь энэ өвчин нь ундны уснаас хамаагүй илүү хүнээс хүнд дамждаг гэсэн санааг төрүүлж, энэ нь шинэ тэмцэх арга хэмжээ авахад хүргэсэн.

1904 оны 12-р сард Кохыг үхрийн халууралтыг судлахаар Зүүн Африк руу илгээсэн бөгөөд тэрээр зөвхөн өвчний талаар төдийгүй эмгэг төрүүлэгч Бабезия, Трипаносома, хачигт спирохоэтозын талаар чухал ажиглалт хийсэн. Профессор Роберт Кох олон шагнал, медаль, Берлин, Вена, Неаполь, Нью-Йорк болон бусад шинжлэх ухааны нийгэмлэг, академийн хүндэт гишүүнээр шагнагдсан. Тэрээр Германы титмийн одон, Германы Улаан бүргэдийн одонгийн Гранд загалмайн одонгоор шагнагджээ. Хэд хэдэн оронд агуу микробиологичийг хүндэтгэн дурсгалын цогцолбор, хөшөө босгосон. Доктор Кох 1910 оны 5-р сарын 27-нд Баден-Баден хотод таалал төгсөв.

Герман улс олон зуун жилийн турш шинжлэх ухааны олон шинэлэг оюун ухаануудыг төрүүлсэн бөгөөд тухайн үеийн хамгийн агуу эрдэмтдийн нэг нь нян судлалын судалгааны үндэс суурийг тавьж, бактерийн янз бүрийн өвчний шалтгаан, боломжит эмчилгээг тайлбарлахад тусалсан Роберт Генрих Херман Кох юм.

Тэрээр боом, сүрьеэ болон бусад олон өвчнийг судлахын тулд урьд өмнө хэзээ ч байгаагүй хүчин чармайлт гаргах үүрэгтэй байсан тул аймшиггүй судлаач байв. Энэхүү эрдэм мэдлэгтэй эрдэмтэн орчин үеийн лаборатори бий болгоход чухал үүрэг гүйцэтгэсэн. Роберт Кох бол зүгээр нэг авъяаслаг эрдэмтэн биш, суут ухаантан байсан бөгөөд амьдралынхаа туршид хүртсэн шагнал, медалийн тоо нь түүний дэлхийн анагаах ухааны шинжлэх ухаанд оруулсан хувь нэмрийн хамгийн сайн нотолгоо болдог.